T790M: мутация в гене рецептора EGFR, влияние на эффективность лечения

T790M — обозначение мутации, которая происходит в гене рецептора эпидермального фактора роста (EGFR). Этот белок представляет собой рецептор, встроенный в клеточную мембрану. Когда он активируется, в клетке запускается каскад биохимических реакций, и она начинает бесконтрольно размножаться.

Мутации, активирующие ген EGFR, встречаются в разных злокачественных опухолях, в частности, при раке легкого. Существуют таргетные препараты, с помощью которых можно заблокировать этот белок: гефитиниб (Иресса), эрлотиниб (Тарцева), афатиниб (Гиотриф). Их назначают при местно-распространенном или метастатическом раке легкого, и они эффективны примерно у 10–20% пациентов с этим заболеванием.

Однако, даже если поначалу ингибиторы EGFR хорошо помогали, постепенно их эффективность снижается. Она сходит на нет в течение 8–12 месяцев. Заболевание начинает снова прогрессировать, в таких случаях говорят, что развилась резистентность. Это происходит из-за того, что в опухолевых клетках возникают новые мутации. Одна из них — T790M.

В чем суть мутации, и как это влияет на эффективность лечения?

Ген белка EGFR находится в седьмой хромосоме. Сам белок является трансмембранным, то есть встроен в клеточную мембрану. Он выполняет рецепторную функцию — принимает сигналы извне и вызывает в клетке определенные эффекты путем активации каскадов биохимических реакций.

T790M: мутация в гене рецептора EGFR, влияние на эффективность лечения

Расположение гена EGFR в геноме человека.

EGFR активируется, когда соединяется с определенными молекулами-лигандами, например, эпидермальным фактором роста. После этого две молекулы EGFR объединяются — происходит реакция димеризации.

Далее, чтобы сигнал передался внутрь клетки, и запустилась цепочка биохимических реакций, нужно, чтобы с частью EGFR, находящейся внутри клетки (тирозинкиназой), связалась молекула аденозинтрифосфата (АТФ).

Из-за некоторых мутаций EGFR постоянно активируется, и клетка начинает бесконтрольно размножаться. Таргетные препараты, такие как гефитиниб и эрлотиниб, занимают место АТФ и не дают ему присоединиться к тирозинкиназе. За счет этого сигнал блокируется.

Однако, все меняется, когда в гене EGFR возникает мутация T790M. Из-за нее повышается сродство тирозинкиназы к АТФ. В результате таргетные препараты не могут вытеснить аденозинтрифосфат и перестают оказывать эффекты.

Известно, что на лечение гефитинибом и эрлотинибом реагируют 10–20% всех пациентов с немелкоклеточным раком легкого и около 85% пациентов с мутацией EGFR. Но даже у них спустя некоторое время развивается резистентность. Более чем в 50% случаев это происходит из-за мутации T790M. В остальных случаях виноваты другие вторичные мутации, такие как L747S, D761Y, Т854А. В некоторых злокачественных опухолях играет роль амплификация (увеличение количества копий) MET, сверхэкспрессия HGF, IGF-1R. Генетические исследования помогают разобраться в причинах лекарственной устойчивости раковых клеток и выбрать дальнейшую оптимальную тактику лечения. T790M: мутация в гене рецептора EGFR, влияние на эффективность лечения

На рисунке показана цепочка биохимических реакций, которую активирует EGFR, действие препаратов, эффекты мутации T790M и других вторичных мутаций. Обозначения: EGFR-TKIs — ингибиторы EGFR; p — фосфорилирование в результате реакции с АТФ.

Аббревиатура T790M отражает характер мутации: в белке происходит замена аминокислоты треонина (T) на метионин (M) в положении 790. Соответственно, в гене происходит замена цитозина на тимин во второй «букве» кодона 790. Так одна небольшая, точечная ошибка кардинальным образом меняет работу белка и реакцию злокачественной опухоли на таргетную терапию.

В каких случаях нужно проводить анализ на мутацию t790m?

Мутации в гене T790M бывают первичными, и тогда пациент изначально не будет реагировать на лечение, но чаще всего они возникают вторично. Именно поэтому терапия сначала работает, а потом становится неэффективной.

Таким образом, тестирование на мутацию T790M показано всем пациентам с немелкоклеточным раком легкого, которые перестали реагировать на терапию ингибиторами тирозинкиназы EGFR.

Как понять, что лечение перестало работать? Для этого пациент регулярно проходит контрольные обследования. Если заболевание начинает прогрессировать (растут опухолевые очаги, появляются новые) — значит, лечение больше не помогает.

Как выявляют мутацию?

Для тестирования не подходят образцы ткани, которые были получены во время предыдущей биопсии и хранятся в лаборатории. Ведь если ранее ингибиторы EGFR помогали, то мутации не было, она возникла позже.

Нужно получить новый материал. Проще всего провести анализ крови: в ней присутствует циркулирующая ДНК опухолевых клеток, и можно обнаружить мутацию T790M. Если результат положительный («мутация обнаружена»), то его подтверждать не требуется. В таких случаях ошибки практически исключены.

Если же результат отрицательный, то рекомендуется провести биопсию опухолевых очагов и перепроверить. А вообще, если есть такая возможность, лучше сразу отправить в лабораторию и плазму, и образцы опухоли. Это поможет сразу получить максимально точный результат.

Схема обследования при подозрении на мутацию T790M может выглядеть следующим образом:

T790M: мутация в гене рецептора EGFR, влияние на эффективность лечения

Как лечить онкологических больных, у которых обнаружена мутация T790M?

Если у пациента обнаружена мутация T790M, ему все еще можно помочь. В таких случаях применяется терапия ингибиторами EGFR третьего поколения. В 2017 году в России был зарегистрирован препарат из этой группы — осимертиниб (Тагриссо).

Его высокая эффективность и безопасность были продемонстрированы в III фазе клинического исследования AURA3 с участием 419 пациентов. Частота объективного ответа на терапию осимертинибом составила 71%, у 90% пациентов заболевание удалось взять под контроль.

Этот препарат достоверно помогает поддерживать высокое качество жизни у больных немелкоклеточным раком легкого с мутацией T790M, которым не помогают ингибиторы EGFR первого и второго поколения.

«Евроонко» сотрудничает с ведущими мировыми лабораториями, благодаря чему у нас есть возможность провести любые генетические анализы, изучить молекулярно-генетический профиль злокачественной опухоли и назначить пациенту персонализированную терапию. В нашей клинике доступны все противоопухолевые препараты последних поколений, зарегистрированные на территории России. Наши врачи готовы немедленно приступить к лечению в соответствии с современными международными протоколами.

Список литературы:

Резистентность к ингибиторам тирозинкиназы EGFR:проблема и пути ее решения

T790M: мутация в гене рецептора EGFR, влияние на эффективность лечения

Рак легкого был и остается самой частой причиной смерти от злокачественных заболеваний в мире, при этом немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) регистрируется в 85% случаев [1]. Химиотерапия, составляющая основу лечения НМРЛ, не всегда демонстрирует достаточную эффективность в отношении данного заболевания [2]. Препараты нового класса, ингибиторы тирозинкиназы (ИТК) EGFR, целью которых являются рецепторы эпидермального фактора роста (EGFR), в частности, препарат гефитиниб, и в клинических испытаниях, и на практике показали многообещающие результаты [3]. Чувствительность к ним определяется наличием в опухолевых клетках соматических мутаций в гене EGFR, представляющих собой небольшие делеции аминокислот 747-750 или точечные мутации (наиболее часто в виде замены лейцина на аргинин в кодоне 858 (L858R)) [4]. Было показано, что применение ИТК у пациентов с подтвержденной мутацией в гене EGFR ассоциируется с увеличением частоты объективных ответов, а также способствует повышению продолжительности жизни без прогрессирования [5]. Тем не менее, успех терапии ИТК НМРЛ с мутацией в гене EGFR в подавляющем большинстве случаев носит временный характер: как правило, после года терапии заболевание начинает прогрессировать [6].

Понятие первичной и приобретенной резистентности

Устойчивость, или резистентность к воздействию химиотерапевтических лекарственных средств, является одним из основных ограничений для лечения онкологических заболеваний, в том числе и немелкоклеточного рака легких (НМРЛ). Опухоли могут демонстрировать как резистентность de novo, то есть первичную, так и вторичную, приобретенную устойчивость.

Первичная резистентность имеет место в случаях, когда некоторые присущие раковым клеткам первичные характеристики обусловливают ее устойчивость к данному классу лекарственных препаратов.

Так, около 25% пациентов с НМРЛ с мутациями EGFR в опухолевых клетках не отвечают на терапию ИТК (по сравнению с 90% среди всех больных НМРЛ) [6].

Известно, что некоторые мутации EGFR, расположенные в экзонах 18-21, ассоциируются с первичной резистентностью к ИТК.

Например, небольшие инсерции или дупликации в экзоне 20 (такие как D770_N771, NPG, SVQ и другие), которые наблюдаются в 5% случаев НМРЛ, менее чувствительны к ИТК, чем опухоли с мутациями в экзоне 19 и L858R [7].

Первичная резистентность к ИТК может также быть результатом и более редких мутаций в EGFR, которые встречаются наряду с мутациями, ответственными за чувствительность к лекарственным препаратам.

Приобретенная резистентность возникает в случаях, когда первично чувствительные к лекарственному препарату опухолевые клетки становятся устойчивыми к терапии уже во время лечения [8].

Причины приобретенной резистентности к ИТК EGFR

Одной из наиболее распространенных причин приобретенной устойчивости к ИТК является вторичная мутация в экзоне 20, которая заключается в замещении метионина на треонин в положении 790 (Т790М) в домене киназы.

Мутации Т790М в EGFR регистрируются более чем в 50% опухолей с приобретенной резистентностью к ИТК [9].

Наряду с Т790М приобретенная устойчивость может быть ассоциирована с другими вторичными мутациями, в том числе L747S (экзон 19) [10], D761Y (экзон 19) [11] и Т854А (экзон 21 в петле активации) [12].

Примерно в 20% случаев вторичной устойчивости к терапии ИТК ее причиной является амплификация онкогена МЕТ, при этом не имеет значения, существует ли мутация Т790М, или нет [13].

Рецептор тирозинкиназы МЕТ мутирует или избыточно экспрессируется при многих опухолях, в том числе НМРЛ.

МЕТ образуется главным образом на клетках эпителиального происхождения и активируется его лигандом, фактором роста гепатоцитов (HGF), отвечая за запуск ряда внутриклеточных сигнальных каскадов [14].

Читайте также:  Белок ELF5 помогает распространяться раку молочной железы

МЕТ и HGF необходимы для эмбрионального развития, так как они участвуют в обнаружении дефектов в эпителиально-мезенхимальном переходе во время органогенеза [15]. Кроме того, они играют важную роль в клеточной пролиферации, ангиогенезе, миграции и инвазии клеток, а также морфогенной дифференциации и тканевой организации.

T790M: мутация в гене рецептора EGFR, влияние на эффективность лечения

Функция МЕТ в опухолях человека может быть повышена за счет амплификации этого рецептора, что приводит к серьезным изменениям, в том числе, пролиферации опухолевых клеток, снижению апоптоза, ангиогенезу, изменению функции цитоскелета и метастазированию, а также развитию устойчивости к ИТК.

Опухоли примерно 40% пациентов с приобретенной резистентностью к ИТК не имеют вторичной мутации Т790М или амплификации МЕТ.

Существуют данные, подтверждающие роль тирозиновой протеинкиназы EGFR/ErbB, которая кодируется геном ERBB2, HER2 в развитии резистентности к ИТК.

Так, в работе Ken Takezawa [16] продемонстрировано, что в 12% случаев приобретенной устойчивости была зафиксирована амплификация HER2 (по сравнению с 1% у пациентов с нелеченной аденокарциномой легких).

Известны случаи, когда у больных с изначально диагностированной аденокарциномой с мутацией EGFR и развившейся приобретенной резистентностью к ИТК во время рецидива был выявлен мелкоклеточный рак легкого (МРЛ) [17]. До сих пор остается неизвестным, вызвана ли трансформация НМРЛ в МРЛ наличием в первичной опухоли компонента мелкоклеточного рака, или процесс ассоциирован с трансдифференциацией аденокарциномы.

In vitro была показана связь между эпителиально-мезенхемальным переходом (ЕМП) и устойчивостью к ИТК EGFR [18]. Более того, данные исследований свидетельствуют, что ЕМП можно выявить и в опухоли пациента [19].

С приобретенной резистентностью может быть ассоциировано и усиление сигнализации от рецептора инсулин-подобного фактора роста (IGF1R), хотя эта связь была продемонстрирована только в модели in vitro с использованием линии клеток, экспрессирующей высокий уровни «дикого» типа EGFR [20]. Следует подчеркнуть, что в механизме развития приобретенной резистентности к ИТК EGFR остается немало белых пятен, и активные исследовательские работы в этой области продолжаются. Одним из наиболее изученных на сегодняшний день механизмов формирования резистентности является самый распространенный – вторичная мутация Т790М.

Сегодня известны по крайней мере два молекулярных механизма, объясняющие, каким образом мутация Т790М придает опухоли лекарственную устойчивость. Во-первых, замена метионина на треонин в положении 790 приводит к изменению связывания препарата в кармане АТФ EGFR.

Во-вторых, мутация Т790М значительно увеличивает афинность АТФ к EGFR-L858R, практически восстанавливая сродство АТФ до уровня «дикого» типа EGFR. Это восстановление закрывает терапевтическое окно, возникающее вследствие сниженной афинности АТФ к онкогенным мутациям, которые обычно более легко ингибируются по сравнению с диким EGFR [21].

Развитие приобретенной устойчивости вследствие мутации Т790М может происходить двумя путями. В первом случае замещение метионина на треонин в Т790М в опухолевых клетках отсутствует изначально и развивается de novo в одной или более клональной популяции на фоне лечения ИТК EGFR.

Во второй модели замещение существует в cis вследствие первичной активирующей мутации у небольшой популяции и «проявляется» в присутствии ИТК EGFR.

Биохимические исследования свойств Т790М показали, что у пациентов с приобретенной резистентностью на фоне вторичной мутации усиливается активность киназы к первично активированным аллелям EGFR, что, возможно, способствует повышению онкогенности [22].

Однако, несмотря на это, больные с мутацией Т790М могут демонстрировать достаточно медленные темпы прогрессирования заболевания [23]. Более того, даже после прекращения терапии ИТК в некоторых случаях регистрируется положительная динамика в развитии заболевания [24].

Это указывает на то, что часть опухолевых клеток все-таки остается чувствительной к ингибированию EGFR. В подтверждение этой теории сообщается о множественных повторных ответах на терапию ИТК после короткого перерыва в таргетной терапии [24].

Добавим, что точный механизм подобного явления до сих пор остается невыясненным.

Возможности лечения НМРЛ у пациентов с приобретенной резистентностью

Учитывая актуальность проблемы резистентности к ИТК, альтернативная длительная стратегия терапии НМРЛ с мутацией EGFR должна учитывать необходимость предотвращения или хотя бы увеличения времени до развития устойчивости.

Один из подходов к рационализации терапии заключается в изучении влияния различных стратегий дозирования с использованием уже существующих ИТК. В его пользу говорит недостаточно углубленное изучение оптимальных режимов дозирования для опухолей с мутацией EGFR.

Математическое моделирование показывает, что различные схемы дозировки могут положительно влиять на развитие устойчивости (пролонгировать резистентность) без ущерба для эффективности [25].

При уже имеющейся вторичной резистентности к ИТК целесообразно назначение дополнительной терапии, ориентированной на подавление механизма лекарственной устойчивости.

Как минимум две возможности комбинирования терапии ИТК предложены на сегодняшний день, и в первую очередь, при помощи препаратов группы ингибиторов сигнальной трансдукции.

Эта схема может применяться при лечении опухолей с подтвержденной мутацией EGFR наряду с избыточной экспрессией и/или аномальной активацией другого фактора роста или рецепторной системы (например, IGFR-I).

В таких случаях комбинация ИТК с ингибиторами сигнальной трансдукции (например, PI3K) может обеспечить более длительный ответ на терапию. Практическая проблема состоит в том, что ингибиторы PI3K имеют целый ряд токсических побочных эффектов из-за существенной роли PI3K в физиологических процессах.

Вторая возможность преодолеть или пролонгировать развитие приобретенной резистентности к ИТК состоит в их комбинации с таргетными антиангиогенными препаратами. Этот способ представляется перспективным как минимум по двум причинам.

В первую очередь, его применение сопряжено с феноменом «двойного удара», при котором выживаемость пациентов обусловлена элиминацией эндотелиальных клеток в дополнение к непосредственной антиопухолевой активности ИТК.

К тому же снижение порога выживаемости опухолевых клеток вследствие ингибирования EGFR может способствовать повышению восприимчивости опухоли к антиангиогенной терапии [26].

Таким образом, комбинирование ИТК и антиангиогенных препаратов может повышать эффективность терапии, уменьшая вероятность выживания и экспансии резистентных популяций опухолевых клеток.

Успех комплексной терапии резистентности к ИТК зависит от возможности быстро определить механизм устойчивости.

С этой целью пациенты с НМРЛ и мутацией EGFR в опухолевых клетках, у которых терапия ИТК была эффективной, при развитии лекарственной резистентности должны подвергнуться повторной биопсии или определению циркулирующей опухолевой ДНК в плазме с целью точного анализа механизма устойчивости.

Проведение повторных биопсий затруднено вследствие инвазивности процедуры, а также вероятности внутриопухолевой гетерогенности, которая может привести к получению некорректного результата [27].

Исследования показывают, что геномные изменения в солидных опухолях могут быть охарактеризованы с помощью массивного параллельного секвенирования циркулирующих внеопухолевых молекул ДНК, высвобожденных из опухолевых клеток.

Этот сравнительно экономичный и быстрый метод, получивший название неинвазивной жидкостной биопсии, может значительно облегчить анализ механизма резистентности [28].

Неинвазивным методом – выделением опухолевой ДНК [29], а также циркулирующих опухолевых клеток из плазмы [30] – может быть успешно выявлена мутация Т790М. Неинвазивный анализ приобретенной резистентности путем выделения ДНК в плазме результативен и при других механизмах развития резистентности [31].

Молекулярно-генетическое тестирование в плазме, с помощью которого можно определить и качественное, и количественное содержание мутаций, сопряженных с резистентностью к ИТК, позволяет дать оценку эффективности терапии ИТК и течению заболевания. Так, в российском исследовании Д.Д. Сакаевой и М.Г.

Гордиева [32], анализировавшем динамику мутаций в гене EGFR в цоДНК при распространенном немелкоклеточном раке легкого на фоне терапии гефитинибом, было показано, что объективный ответ на терапию коррелировал с исчезновением активирующих мутаций EGFR в плазме.

Повторное же появление в плазме крови активирующих мутаций EGFR и/или Т790М являлось одним из предикторов прогрессии НМРЛ.

Осимертиниб: таргетная терапия Т790М-позитивного НМРЛ

Высокая частота активирующих мутаций, сопряженных с резистентностью к ИТК EGFR, обусловила активизацию поиска новых таргетных препаратов, которые помогли бы решить проблему устойчивости.

Определенно самым значимым достижением в терапии Т790М-позитивного НМРЛ последних лет стало создание первого ИТК третьего поколения, действующего как на активирующую мутацию, так и на мутацию вторичной резистентности Т790М в гене EGFR, – осимертиниба.

Осенью 2017 года препарат Тагриссо® (осимертиниб) был зарегистрирован в РФ для терапии местнораспространенного или метастатического НМРЛ с мутацией Т790М в гене EGFR.

Осимертиниб представляет собой необратимый ингибитор ТК EGFR, эффективный при наличии сенсибилизирующих мутаций гена EGFR и мутации Т790М, связанной с развитием резистентности к ИТК [33].

Препарат селективно действует на клетки как с активирующими мутациями гена EGFR (мутация L858R в 21-м экзоне, делеции в 19 экзоне), так и с мутацией резистентности Т790М, являющейся основной причиной резистентности к ИТК EGFR 1-2 поколений.

Читайте также:  Паллиативная химиотерапия в лечении онкологических заболеваний

Осимертиниб отличается высокой активностью и ингибирующим действием в отношении EGFR во всех клинически значимых линиях НМРЛ, несущих сенсибилизирующие мутации EGFR и мутацию резистентности Т790М, что приводит к подавлению клеточного роста [33]. При этом препарат демонстрирует низкую активность в отношении клеточных линий, имеющих дикий тип EGFR (IC50 461-650 наномоль для различных клеточных линий).

Основанием для одобрения препарата стали результаты рандомизированного клинического исследования III фазы AURA3 [34] с участием 419 пациентов с Т790М-позитивным НМРЛ, прогрессирующим после терапии первой линии ИТК EGFR.

В ходе исследования осимертиниб продемонстрировал статистически значимое преимущество по эффективности в сравнении с комбинацией пеметрексед/платина по показателю выживаемость без прогрессирования, составившему 10,1 месяца на осимертинибе в сравнении с 4,4 месяца на химиотерапии (ОР 0,3; 70% снижение риска; 95% ДИ: 0,23-0,41; p

EGFR анализ крови — что это, норма показателей, расшифровка

T790M: мутация в гене рецептора EGFR, влияние на эффективность лечения Функции, мутации, а так же методы лечения

Что такое EGFR

Человеческое тело – сложная система, для нормального функционирования  которой отдельные клетки должны подчиняться общим законам. Нарушение клетками своей «роли» приводит к дисбалансу и заболеваниям.

Ученые выделяют белки и молекулы, отвечающие за регулирование жизни клеток, их нормальную работу.

Рецептор эпидермального фактора роста (сокращенно – EGFR) – одна из таких молекул. Открытие ее С.Коэном и Р.Леви-Монтальчини было удостоено Нобелевской премии 1986 года.

Функции EGFR

Одно из ключевых слов в названии EGFR – «рецептор». Именно так называют нервные окончания, позволяющие на что-то чувствовать, например, вкус, тепло и т.д.

Если говорить о молекулярной биологии, то рецептор локализуется на клеточной поверхности, причем одна его часть – снаружи, другая – внутри клетки, и способствует чувствительности клетки к молекулярным сигналам.

Когда сигнальная молекула соприкасается с клеткой и начинается ее взаимодействие с рецептором, белок начинает активизацию и запускает множественные биохимические реакции в клетке. В результате этого начинается размножение клетки.

Для нормального функционирования системы человеческого организма подобные сигналы должны возникать в строго определенное время, иначе последствия могут быть самые серьезные.

Именно повышенная активность рецептора становится причиной бесконтрольного размножения клеток, что и приводит к раковым заболеваниям.

Мутации EGFR

Изменение гена EGFR определены при самых разных типах и формах онкологии.

Частота экспрессии EGFR чрезвычайно высока и достигает:

  • Немелкоклеточный рак легкого – до 80%;
  • Онкология толстой кишки – до 77%;
  • Онкология яичников – до 70%;
  • Онкология предстательной железы – до 40%;
  • Онкология желудка – до 35%;
  • Онкология молочной железы – до 30%.

Вследствие повышения активности EGFR раковые клетки размножаются быстрее, они агрессивны, прорастают в соседние ткани и органы, метастазируют. Кроме того, начинается процесс образования кровеносных сосудов, которые питают опухоль.

Многочисленные исследования и медицинская практика показывают, что мутированные EGFR значительно ухудшают прогноз для больного.

Это понимание привело ученых к мысли создания препаратов, способных блокировать этот белок.

Но проблема в том, что молекулярно-генетические свойства и гистологический тип рака не всегда связаны друг с другом. Даже если рассматривать два одинаковых типа рака, то может выясниться, в одном активность EGFR выше нормы, а в другой наоборот, низкая.

Поэтому ставится под сомнение вопрос об эффективности медицинских препаратов из группы блокаторов EGFR. Чтобы вопрос этот снять, необходимы специальные анализы.

Исследование на EGFR: кому показано?

Показанием к анализу является немелкоклеточная онкология легкого (особенно аденокарцинома), в случаях, если больному показано лечение ингибиторами EGFR. Важность анализа в том, что он даст ответ оптимальности терапии.

Ингибиторы EGFR эффективны для подавляющего большинства пациентов (80%), у которых диагностированы изменения в гене EGFR.

Если таких мутаций нет, ингибиторы EGFR будут оптимальны лишь у 10%.

По наблюдениям специалистов, ингибиторы EGFR работают в среднем 8 месяцев, после чего опухоль перестает на них реагировать из-за того, что в ней начинаются новые мутации. И важно сделать повторный анализ образца опухоли.

Еще одна проблема состоит в том, что не все мутации в данном гене чувствительны к ингибиторам EGFR. Мутация T790M, напротив, вызывает резистентность. Если такая мутация обнаружена, применяют осимертиниб, который в таком случае достаточно эффективен.

Исследования мутаций в гене EGFR выполняются как отдельно, так и комплексно, когда нужен анализ иных мутаций.

Методы определения характеристики мутаций EGFR

Первый этап исследования – биопсия. Важно, чтобы материал исследования содержал достаточно раковых клеток и имел большой размер.

Для обнаружения изменившегося гена EGFR, часто используют полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Данный метод позволяет с помощью ферментов создать множество копий ДНК.

По завершении анализа может быть 2 заключения:

  • Мутация в гене EGFR обнаружена, с обязательным указанием ее характеристики;
  • Мутация не обнаружена.

Учитывая это, врач определяет, какую тактику лечения выбрать.

Методы лечения

Ингибиторы EGFR входят в группу препаратов таргетных, которые действуют точечно на конкретную молекулу, не поражая все ускоренно размножающиеся клетки подряд.

Так для лечения онкологии толстой кишки применяют:

  • Панитумумаб (Вектибикс);
  • Цетуксимаб (Эрбитукс).

Для лечения опухоли легкого используют:

  • Афатиниб (Гиотриф);
  • Бригатиниб (Алунбриг);
  • Гефитиниб (Иресса);
  • Икотиниб (Конмана);
  • Эрлотиниб (Тарцева).

Вследствие разной химической структуры и разных механизмов действия все ингибиторы EGFR делят на 2 группы:

  • Малые молекулы. Они воздействуют часть EGFR, находящуюся внутри клетки и запускающую биохимические реакции, если рецептор активен.
  • Моноклональные антитела. Воздействуют на участок EGFR, находящийся снаружи клетки. Препараты этой группы, воздействуя на этот участок, не дают рецептору активироваться.

Таргетные препараты могут стать причиной ряда побочных эффектов, например, потери аппетита, сыпи, диареи. Серьезных побочных эффектов не выявлено.

Современные научные исследования открывают для клинической практики хорошие перспективы лекарственного лечения онкологических заболеваний. Одним из принципиально новых механизмов противоракового контроля является регулирование активности EGFR.

В клинике интегративной онкологии Onco.Rehab применяются таргетные препараты, зарегистрированные на территории нашей страны.

У нас Вы можете также провести молекулярно-генетические исследования, которые могут обнаружить мутации, что крайне важно для подбора оптимальной лечебной тактики.

Определение мутации T790M гена EGFR (биопсийный/операционный материал) в Москве

Код GNP151 Операц. материал

Лабораторный анализ для выявления мутации Т790М (ген EGFR) при немелкоклеточном раке легкого на фоне развития резистентности (нечувствительности) к терапии ингибиторами тирозинкиназы (ИТК). Результат исследования позволяет определить пациентов, которые будут иметь наиболее высокую вероятность ответа на терапию ИТК 3 поколения. 

  • Приём, исследование биоматериала
  • Показания к назначению
  • Описание

Приём материала

  • Можно сдать в отделении Гемотест
  • Можно сдать анализ дома

Подготовка к анализу Расшифровка и референсы Сдать анализ на дому

  1. Диагностика, подбор и оценка эффективности терапии немелкоклеточного рака легких;
  2. Комплексная диагностика злокачественных эпителиальных опухолей других локализаций.

Подробное описание исследования

Данное исследование определяет мутации гена EGFR со специфической аномалией T790M.

Ген EGFR располагается на 7p12 (12 сегменте короткого плеча 7 хромосомы) и кодирует одноименный белок — рецептор эпидермального фактора роста EGFR. Основная роль этого рецептора заключается в регуляции важных клеточных функций: рост, развитие, выживание, созревание, миграция и др.

При развитии мутации гена EGFR изменяется строение и функция рецептора EGFR. Измененный белок постоянно находится в активированном состоянии, что ведет к стимуляции бесконтрольного деления аномальных опухолевых клеток, поддерживает их повышенную выживаемость и способствует метастазированию. Генетическая поломка EGFR наиболее часто встречается при немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ).

Установлено, что аномалии EGFR выявляются примерно у 15-25% пациентов с НМРЛ НМРЛ. Белки-рецепторы EGFR обладают тирозинкиназной активностью, поэтому при лечении НМРЛ с выявленной мутацией гена EGFR применяют таргетную (прицельную) терапию — ингибиторы тирозинкиназы (ИТК). На данный момент разработано 3 поколения ИТК EGFR для лечения НМРЛ.

У 60% больных НМРЛ в течение 8-14 месяцев лечения возникает резистентность (нечувствительность) к ингибиторам тирозинкиназы EGFR 1 и 2 поколения.

Резистентность развивается на фоне появления вторичной мутации  T790M в 20 экзоне гена EGFR, где происходит замена аминокислоты треонин на метионин.

 У части пациентов (менее 2%) с местнораспространенным или метастатическим типом немелкоклеточного рака легкого генетическая аномалия Т790М гена EGFR может быть причиной первичной нечувствительности  к ИТК 1 и 2 поколения.

Выявление мутации T790M привело к необходимости создания ингибитора третьего поколения (осимертиниб), который является средством таргетной (прицельной) терапии, действующей исключительно на область T790M.

Читайте также:  Гастро- и колоноскопия под внутривенной седацией

Что ещё назначают с этим исследованием?

Использованная литература

  1. Клинические рекомендации по раку легкого, 2019. — 51 с.
  2. Kumar, V., Abbas, A., Fausto, N. et al. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease, 2014. — 1464 p.  
  3. Ko, B., Paucar, D., Halmos, B. EGFR T790M: revealing the secrets of a gatekeeper. Lung Cancer (Auckl), 2017. — Vol. 8.

    — P. 147-159. 

  4. Liao, B., Griesing, S., Yang, J. Second-line treatment of EGFR T790M-negative non-small cell lung cancer patients. — Ther Adv Med Oncol., 2019. — Vol. 11.  
  5. Normanno, N., Maiello, M., Chicchinelli, N. et al. Targeting the EGFR T790M mutation in non-small-cell lung cancer.

    — Expert Opin Ther Targets, 2017. — Vol. 21(2). — P. 159-165. 

  6. Kim, R., Lapuk, A., Harraway, J. et al. Prevalence of the EGFR T790M and other resistance mutations in the Australian population and histopathological correlation in a small subset of cases. — Pathology, 2020. — Vol. 52(4). — P. 410-420.

     

Другие названия этого исследования

Названия на английском языке

Analysis of EGFR T790M detection,EGFR Gene,Epidermal Growth Factor Receptor

Результат анализа не является диагнозом и должен интерпретироваться только врачом.

ЦЕНА ИССЛЕДОВАНИЯ

6 000 ₽

Цена исследования

6 000 ₽

6 000 ₽ Добавить в корзину

6 000 ₽ Добавить в корзину

К началу страницы ↑

Определение мутации гена EGFR в тканях опухолей

  • Определение мутации гена EGFR в тканях опухолей – молекулярно-генетическое исследование биоптата опухолевой ткани, позволяющее выявить наличие определенных мутаций в гене рецептора эпидермального фактора роста, играющих роль в злокачественной трансформации.
  • Синонимы русские
  • Тест на мутации гена EGFR, мутации гена рецептора эпидермального фактора роста — EGFR, прогноз терапии при НМРЛ, немелкоклеточный рак легкого, таргетная терапия.
  • Синонимы английские
  • EGFR Mutation Testing, Epidermal Growth Factor Receptor Mutation Analysis, HER-1, erbB-1.
  • Метод исследования
  • Автоматическое секвенирование.
  • Какой биоматериал можно использовать для исследования?
  • Образец ткани (в парафиновом блоке).
  • Как правильно подготовиться к исследованию?
  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Современные успехи в лечении онкологических заболеваний во многом связаны с обнаружением молекулярных механизмов возникновения и развития злокачественных новообразований, отличающих их от клеток нормальных тканей, и появлением лекарственных препаратов, способных воздействовать на них.

Такие лекарства называются таргетными, то есть действующими на определенную «цель» в опухолевой клетке. Они обладают хорошим профилем безопасности, так как, в отличие от стандартной химиотерапии, практически не действуют на нормальные ткани и характеризуются большей эффективностью.

Однако назначение таргетных препаратов возможно лишь при обнаружении в опухолевых клетках специфической мишени для их действия.

Одной из таких молекулярных особенностей опухолевых клеток при немелкоклеточном раке легкого является мутация в гене, кодирующем аминокислотную последовательность рецептора эпидермального фактора роста (EGFR).

Рецептор представляет собой белок, расположенный в оболочке клетки и способный связываться со специфическими веществами, которые его активируют, – факторами роста. При стимуляции рецептора внутри клетки запускается каскад биохимических реакций, который называется сигнальным путём.

Сигнальный путь EGFR участвует в регуляции роста, деления, выживания и гибели клеток. При так называемых активирующих мутациях в гене EGFR в клетке вырабатывается аномальный рецептор, который способен активировать свой сигнальный путь независимо от связывания с фактором роста, инициируя тем самым процесс злокачественной трансформации.

Это приводит к повышению пролиферации опухолевых клеток, росту опухоли, стимуляции ее внедрения в окружающие ткани и метастазирования.

Открытие роли сигнального пути EGFR в онкогенезе послужило стимулом к созданию препаратов, способных воздействовать на этот механизм, – ингибиторов EGFR: гефитиниб (иресса), эрлотиниб (тарцева) и афатиниб (гиотриф).

Это небольшие молекулы, которые проникают в раковые клетки, ингибируют тирозинкиназы — ключевые ферменты патологического сигнального пути — и препятствуют передаче пролиферативных стимулов. Стоит отметить, что существует несколько активирующих мутаций гена EGFR.

Некоторые из них определяют чувствительность опухолевых клеток к ингибиторам тирозинкиназ — Del19, L858R, G719X, L861Q, S768I, — а некоторые, наоборот, устойчивость к ним — Ins20, T790M. Мутация Т790М в гене EGFR является наиболее частой причиной возникновения резистентности к проводимой таргетной терапии. Своевременное ее выявление помогает выяснить причину неэффективности терапии ингибиторами тирозинкиназ и принять решение о смене препаратов. Поэтому для назначения эффективной таргетной терапии всем пациентам необходимо тестирование на наличие как мутаций чувствительности, так и мутаций устойчивости.

Материалом для исследования служит ДНК опухолевых клеток. Она может быть выделена из биоптата опухоли, находящегося в парафиновом блоке. Если же на исследование предоставлен образец опухоли в емкости с фиксирующим раствором, из него изготавливаются парафиновые блоки для возможности длительного хранения и использования в последующем для других диагностических тестов.

Для чего используется исследование?

  • Для определения показаний к терапии низкомолекулярными ингибиторами EGFR у пациентов с немелкоклеточным раком легкого (как местнораспространенные, так и метастатические стадии).

Когда назначается исследование?

  • При наличии гистологически верифицированного немелкоклеточного рака легкого — впервые выявленные, рецидивирующие и метастатические опухоли.

Что означают результаты?

  • Положительный результат — мутация обнаружена. Также указывается вид выявленной мутации.
  • Отрицательный результат – мутации не обнаружены.

Что может влиять на результат?

Нарушение техники фиксации биопсийного материала, которое может привести к деградации генетического материала и невозможности тестирования.

Важные замечания

  • Терапия немелкоклеточного рака легкого с выявленными мутациями гена EGFR ингибиторами тирозинкиназ 1 и 2 поколения (гефитиниб, эрлотиниб, афатиниб) через 8-12 месяцев обычно становится неэффективной. В 60% случаев это происходит из-за появления мутации Т790М, обуславливающей резистентность опухоли к этим препаратам. Поэтому при признаках прогрессирования заболевания на фоне терапии ИТК 1 и 2 поколения необходимо проведение тестирования на мутацию Т790М в гене EGFR. При этом на исследование должен направляться материал, полученный после прогрессирования опухоли. Первоначально возможно исследование плазмы крови. Пациенты с выявленной мутацией Т790М, как правило, отвечают на терапию другим препаратом – осимертинибом.
  • Если мутации гена EGFR не обнаружены, необходимо провести тестирование на перестройку гена ALK и мутацию гена BRAFV600. Это мутации, которые также играют роль в возникновении немелкоклеточного рака легкого, но встречаются реже, чем мутации EGFR, и не сочетаются с ними. Для них также существуют таргетные препараты.
  • В некоторых стандартах диагностики рекомендуется также тестирование на мутации гена KRAS, кодирующего один из белков в цепи сигнального пути EGFR. Они более характерны для колоректального рака, но в 16% случаев встречаются и при немелкоклеточном раке легкого. Наличие мутаций гена KRAS приводит к неэффективности блокирования EGFR таргетными препаратами, так как сигнальный путь активируется независимо от рецептора. Таким образом, если перед исследованием на мутации EGFR уже выполнялось тестирование на мутации KRAS и его результат положительный – целесообразность теста на мутации EGFR и применение таргетных препаратов следует обсудить с врачом. Однако в качестве первичной диагностики исследование биоптата немелкоклеточного рака легкого на мутации KRAS нецелесообразно, тест на мутации EGFR в этой ситуации более предпочтителен.
  • По некоторым данным, избыточное количество EGFR отмечается и при опухолях другой локализации – толстой кишки, поджелудочной железы, молочных желез. Однако на данный момент оценка мутационного статуса гена EGFR, как и применение таргетных препаратов, рекомендована только для мелкоклеточного рака легкого.

Также рекомендуется

  • Цитологическое исследование материала, полученного при оперативном вмешательстве
  • Цитологическое исследование материала, полученного при эндоскопии (бронхоскопия)
  • Гистологическое исследование биопсийного материала
  • Гистологическое исследование биоптата лимфатического узла (1 узел) с использованием рутинных методик окраски
  • Определение мутации гена BRAF в тканях опухолей
  • Определение перестройки гена ALK при раке легкого методом ИГХ
  1. Кто назначает исследование?
  2. Онколог, химиотерапевт.
  3. Литература
  1. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e  by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 1500-1501.

  2. The Basic science of Oncology. Fifth edition. Ian F. Tannock, Robert G. Bristow, Richard P. Hill, Lea Harrington. McGrow-Hill Education, 2013. Pages 173-179.

  3. Программа RUSSCO «Совершенствование молекулярно-генетической диагностики в российской федерации». Практическое руководство для врачей. www.cancergenome.ru

  4. Доклад «Современные возможности таргетной терапии НМРЛ», Имянитов Е. Н. Вестник московского онкологического общества, №11 (602), 2013. С. 3-6.

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Adblock
detector